1. Účel: Cílem tohoto postupu je poskytnout standardizovaný postup pro aseptické operace a ochranu sterilních místností.
2. Oblast použití: biologická zkušební laboratoř
3. Odpovědná osoba: Kontrolor kontroly kvality
4.Definice: Žádná
5. Bezpečnostní opatření
Přísně provádějte aseptické operace, abyste zabránili mikrobiální kontaminaci;obsluha by měla před vstupem do sterilní místnosti vypnout UV lampu.
6.Postupy
6.1.Sterilní místnost by měla být vybavena sterilním operačním sálem a vyrovnávací místností.Čistota sterilního provozního prostoru by měla dosahovat třídy 10000. Vnitřní teplota by měla být udržována na 20-24°C a vlhkost by měla být udržována na 45-60%.Čistota čisté lavice by měla dosahovat třídy 100.
6.2.Sterilní místnost by měla být udržována v čistotě a je přísně zakázáno hromadit nečistoty, aby se zabránilo kontaminaci.
6.3.Důsledně zabraňte kontaminaci veškerého sterilizačního zařízení a kultivačních médií.Ti, kteří jsou kontaminovaní, by je měli přestat používat.
6.4.Sterilní místnost by měla být vybavena dezinfekčními prostředky s pracovní koncentrací, jako je 5% roztok kresolu, 70% alkohol, 0,1% roztok chlormethioninu atd.
6.5.Sterilní místnost by měla být pravidelně sterilizována a čištěna vhodným dezinfekčním prostředkem, aby se zajistilo, že čistota sterilní místnosti splňuje požadavky.
6.6.Všechny nástroje, nástroje, nádobí a další předměty, které je třeba přenést do sterilní místnosti, by měly být pevně zabaleny a sterilizovány vhodnými metodami.
6.7.Před vstupem do sterilní místnosti si personál musí umýt ruce mýdlem nebo dezinfekčním prostředkem a poté se před vstupem do sterilní místnosti převléknout do speciálního pracovního oděvu, obuvi, klobouků, masek a rukavic (nebo si znovu otřít ruce 70% etanolem).Provádějte operace v bakteriální komoře.
6.8.Před použitím sterilní místnosti musí být ve sterilní místnosti zapnuta ultrafialová lampa pro ozařování a sterilizaci po dobu delší než 30 minut a zároveň musí být zapnuta čistá lavice pro foukání vzduchu.Po dokončení operace by měla být sterilní místnost včas vyčištěna a poté sterilizována ultrafialovým světlem po dobu 20 minut.
6.9.Před kontrolou by měl zůstat vnější obal zkušebního vzorku neporušený a nesmí být otevřen, aby se zabránilo kontaminaci.Před kontrolou použijte 70% alkoholové vatové tampony k dezinfekci vnějšího povrchu.
6.10.Během každé operace by měla být provedena negativní kontrola pro kontrolu spolehlivosti aseptického provozu.
6.11.Při nasávání bakteriální tekutiny musíte k jejímu vstřebání použít sací kouli.Nedotýkejte se brčka přímo ústy.
6.12.Inokulační jehlu je nutné před a po každém použití sterilizovat plamenem.Po ochlazení lze kulturu naočkovat.
6.13.Brčka, zkumavky, Petriho misky a další náčiní obsahující bakteriální tekutinu je třeba namočit do sterilizačního kbelíku obsahujícího 5% roztok lysolu pro dezinfekci a po 24 hodinách vyjmout a opláchnout.
6.14.Pokud se na stůl nebo podlahu rozlije bakteriální tekutina, měli byste kontaminovanou oblast před ošetřením okamžitě nalít 5% roztokem kyseliny karbolové nebo 3% lyzolu po dobu alespoň 30 minut.Pokud jsou pracovní oděvy a čepice kontaminovány bakteriální tekutinou, měly by být ihned svléknuty a po sterilizaci vysokotlakou parou vyprány.
6.15.Všechny předměty obsahující živé bakterie musí být před opláchnutím pod tekoucí vodou dezinfikovány.Je přísně zakázáno znečišťovat kanalizaci.
6.16.Počet kolonií ve sterilní místnosti by měl být kontrolován měsíčně.Při otevřené čisté lavici vezměte několik sterilních Petriho misek o vnitřním průměru 90 mm a asepticky vstříkněte asi 15 ml živného agarového kultivačního média, které bylo rozpuštěno a ochlazeno na asi 45 °C.Po ztuhnutí postavte dnem vzhůru při 30 až 35 °C. Inkubujte 48 hodin v inkubátoru při teplotě ℃.Po prokázání sterility odeberte 3 až 5 destiček a umístěte je vlevo, uprostřed a vpravo od pracovní polohy.Po otevření krytu a vystavení po dobu 30 minut je umístěte dnem vzhůru do inkubátoru při teplotě 30 až 35 °C na 48 hodin a vyjměte je.prozkoumat.Průměrný počet různých bakterií na misce v čistém prostoru třídy 100 nesmí překročit 1 kolonii a průměrný počet v čistém prostoru třídy 10 000 nesmí překročit 3 kolonie.V případě překročení limitu by měla být sterilní místnost důkladně dezinfikována, dokud opakované kontroly nesplní požadavky.
7. Viz kapitola (Metoda kontroly sterility) v "Metody hygienické kontroly léčiv" a "Standardní čínské operační postupy pro kontrolu léčiv".
8. Oddělení distribuce: Oddělení řízení jakosti
Technický návod pro čistou místnost:
Po získání sterilního prostředí a sterilních materiálů musíme udržovat sterilní stav, abychom mohli studovat konkrétní známý mikroorganismus nebo využívat jeho funkce.V opačném případě se mohou snadno přimíchat různé mikroorganismy zvenčí. Jev míšení irelevantních mikroorganismů zvenčí se v mikrobiologii nazývá kontaminující bakterie.Prevence kontaminace je klíčovou technikou v mikrobiologické práci.Úplná sterilizace na jedné straně a prevence kontaminace na straně druhé jsou dva aspekty aseptické techniky.Dále musíme zabránit tomu, aby zkoumané mikroorganismy, zejména patogenní mikroorganismy nebo v přírodě neexistující geneticky upravené mikroorganismy, unikaly z našich experimentálních nádob do vnějšího prostředí.Pro tyto účely v mikrobiologii existuje mnoho opatření.
Sterilní místnost je obvykle malá místnost speciálně zřízená v mikrobiologické laboratoři.Lze postavit z plechů a skla.Plocha by neměla být příliš velká, asi 4-5 metrů čtverečních a výška by měla být asi 2,5 metru.Vyrovnávací místnost by měla být zřízena mimo sterilní místnost.Dveře vyrovnávací místnosti a dveře sterilní místnosti by neměly směřovat stejným směrem, aby se zabránilo proudění vzduchu vnášet různé bakterie.Sterilní i vyrovnávací místnost musí být vzduchotěsné.Vnitřní ventilační zařízení musí mít zařízení na filtraci vzduchu.Podlaha a stěny sterilní místnosti musí být hladké, obtížně se na nich ulpívají nečistoty a snadno se čistí.Pracovní plocha by měla být rovná.Sterilní místnost i vyrovnávací místnost jsou vybaveny ultrafialovým světlem.Ultrafialová světla ve sterilní místnosti jsou 1 metr od pracovní plochy.Personál vstupující do sterilní místnosti by měl nosit sterilizované oblečení a čepice.
V současné době jsou sterilní místnosti většinou v mikrobiologických továrnách, zatímco běžné laboratoře používají čisté lavice.Hlavní funkcí čisté lavice je použití zařízení s laminárním prouděním vzduchu k odstranění různých drobných prachů včetně mikroorganismů na pracovní ploše.Elektrické zařízení umožňuje průchod vzduchu přes hepa filtr a následně vstup na pracovní plochu, takže pracovní plocha je vždy udržována pod kontrolou proudícího sterilního vzduchu.Kromě toho je na straně blízko k vnější straně vysokorychlostní vzduchová clona, která zabraňuje vnikání vnějšího bakteriálního vzduchu.
V místech se ztíženými podmínkami lze místo čisté lavice použít i dřevěné sterilní boxy.Sterilní box má jednoduchou strukturu a snadno se přemisťuje.Na přední straně boxu jsou dva otvory, které jsou blokovány push-pull dvířky, když nejsou v provozu.Během operace můžete natáhnout ruce.Horní část čela je opatřena sklem pro usnadnění vnitřního ovládání.Uvnitř boxu je ultrafialová lampa a malými bočními dvířky lze dovnitř vložit nádobí a bakterie.
Aseptické operační techniky v současnosti hrají nejen klíčovou roli v mikrobiologickém výzkumu a aplikacích, ale jsou také široce používány v mnoha biotechnologiích.Například transgenní technologie, technologie monoklonálních protilátek atd.
Čas odeslání: březen-06-2024