V čistém prostoru existují dva hlavní zdroje kontaminace: částice a mikroorganismy, které mohou být způsobeny lidskými a environmentálními faktory nebo souvisejícími činnostmi v procesu. I přes maximální úsilí bude kontaminace stále pronikat do čistých prostor. Mezi specifické běžné nosiče kontaminace patří lidská těla (buňky, vlasy), faktory prostředí, jako je prach, kouř, mlha nebo vybavení (laboratorní vybavení, čisticí zařízení) a nesprávné techniky utírání a metody čištění.
Nejčastějším přenašečem kontaminace jsou lidé. I přes nejpřísnější oblečení a nejpřísnější provozní postupy jsou největší hrozbou kontaminace v čistých prostorách nevhodně vyškolení operátoři. Zaměstnanci, kteří nedodržují pokyny pro čisté prostory, jsou vysoce rizikovým faktorem. Dokud jeden zaměstnanec udělá chybu nebo zapomene krok, povede to ke kontaminaci celého čistého prostoru. Společnost může zajistit čistotu čistého prostoru pouze nepřetržitým sledováním a průběžnou aktualizací školení s nulovou mírou kontaminace.
Dalšími hlavními zdroji kontaminace jsou nástroje a vybavení. Pokud je vozík nebo stroj před vstupem do čistého prostoru jen hrubě otřen, může to přinést mikroorganismy. Zaměstnanci si často neuvědomují, že kolové zařízení se při tlačení do čistého prostoru převaluje po kontaminovaných plochách. Povrchy (včetně podlah, stěn, vybavení atd.) jsou rutinně testovány na životaschopné počty pomocí speciálně navržených kontaktních destiček obsahujících růstová média, jako je Trypticase Soy Agar (TSA) a Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA je růstové médium určené pro bakterie a SDA je růstové médium určené pro plísně a kvasinky. TSA a SDA se typicky inkubují při různých teplotách, přičemž TSA jsou vystaveny teplotám v rozmezí 30-35˚C, což je optimální teplota růstu pro většinu bakterií. Rozsah 20-25˚C je optimální pro většinu druhů plísní a kvasinek.
Proudění vzduchu bylo kdysi běžnou příčinou kontaminace, ale dnešní systémy HVAC pro čisté prostory prakticky eliminovaly kontaminaci vzduchu. Vzduch v čistém prostoru je pravidelně kontrolován a monitorován (např. denně, týdně, čtvrtletně) z hlediska počtu částic, počtu životaschopných částic, teploty a vlhkosti. HEPA filtry se používají ke kontrole počtu částic ve vzduchu a mají schopnost odfiltrovat částice až do velikosti 0,2 µm. Tyto filtry jsou obvykle udržovány v nepřetržitém provozu při kalibrovaném průtoku, aby byla zachována kvalita vzduchu v místnosti. Vlhkost se obvykle udržuje na nízké úrovni, aby se zabránilo množení mikroorganismů, jako jsou bakterie a plísně, které preferují vlhké prostředí.
Ve skutečnosti je nejvyšší úrovní a nejčastějším zdrojem kontaminace v čistém prostoru operátor.
Zdroje a vstupní cesty kontaminace se v jednotlivých odvětvích výrazně neliší, ale mezi průmyslovými odvětvími existují rozdíly, pokud jde o tolerovatelné a netolerovatelné úrovně kontaminace. Například výrobci poživatelných tablet nemusí udržovat stejnou úroveň čistoty jako výrobci injekčních přípravků, které jsou přímo vpravovány do lidského těla.
Výrobci léčiv mají nižší toleranci k mikrobiální kontaminaci než výrobci high-tech elektroniky. Výrobci polovodičů, kteří vyrábějí mikroskopické produkty, nemohou přijmout žádnou kontaminaci částicemi, aby zajistili funkčnost produktu. Těmto firmám proto jde pouze o sterilitu implantovaného produktu do lidského těla a funkčnost čipu či mobilního telefonu. Relativně méně se obávají plísní, hub nebo jiných forem mikrobiální kontaminace v čistých prostorách. Na druhou stranu se farmaceutické společnosti obávají všech živých i mrtvých zdrojů kontaminace.
Farmaceutický průmysl je regulován FDA a musí přísně dodržovat předpisy Správné výrobní praxe (GMP), protože důsledky kontaminace ve farmaceutickém průmyslu jsou velmi škodlivé. Výrobci léků musí nejen zajistit, aby jejich produkty neobsahovaly bakterie, ale také musí mít dokumentaci a vše sledovat. Společnost zabývající se špičkovými technologiemi může dodávat notebook nebo televizor, pokud projde interním auditem. Pro farmaceutický průmysl to ale není tak jednoduché, a proto je pro společnost klíčové mít, používat a dokumentovat provozní postupy v čistých prostorách. Vzhledem k nákladům si mnoho společností najímá externí profesionální úklidové služby k provádění úklidových služeb.
Komplexní program testování prostředí čistých prostor by měl zahrnovat viditelné a neviditelné částice ve vzduchu. Ačkoli neexistuje požadavek, aby všechny kontaminanty v těchto kontrolovaných prostředích byly identifikovány mikroorganismy. Program kontroly životního prostředí by měl zahrnovat vhodnou úroveň bakteriální identifikace extrakcí vzorků. V současné době existuje mnoho metod identifikace bakterií.
Prvním krokem v identifikaci bakterií, zejména pokud jde o izolaci čistých prostor, je metoda Gramova barvení, protože může poskytnout interpretační vodítka ke zdroji mikrobiální kontaminace. Pokud mikrobiální izolace a identifikace prokáže grampozitivní koky, kontaminace může pocházet od lidí. Pokud mikrobiální izolace a identifikace ukazuje grampozitivní tyčinky, kontaminace mohla pocházet z kmenů odolných vůči prachu nebo dezinfekčním prostředkům. Pokud mikrobiální izolace a identifikace ukazuje gramnegativní tyčinky, zdroj kontaminace mohl pocházet z vody nebo jakéhokoli vlhkého povrchu.
Mikrobiální identifikace ve farmaceutických čistých prostorách je velmi nezbytná, protože souvisí s mnoha aspekty zajištění kvality, jako jsou biologické testy ve výrobních prostředích; testování bakteriální identifikace konečných produktů; nejmenované organismy ve sterilních produktech a vodě; kontrola kvality technologie fermentačního skladování v biotechnologickém průmyslu; a ověření mikrobiálního testování během validace. Metoda FDA, která potvrzuje, že bakterie mohou přežít ve specifickém prostředí, bude stále běžnější. Když úrovně mikrobiální kontaminace překročí stanovenou úroveň nebo výsledky testu sterility naznačují kontaminaci, je nutné ověřit účinnost čisticích a dezinfekčních prostředků a vyloučit identifikaci zdrojů kontaminace.
Existují dva způsoby monitorování povrchů čistého prostředí:
1. Kontaktní desky
Tyto speciální kultivační misky obsahují sterilní růstové médium, které je připraveno výše, než je okraj misky. Kryt kontaktní destičky pokrývá povrch, ze kterého se má odebírat vzorek, a veškeré mikroorganismy viditelné na povrchu přilnou k povrchu agaru a inkubují se. Tato technika může ukázat počet mikroorganismů viditelných na povrchu.
2. Metoda výtěru
Je sterilní a skladuje se ve vhodné sterilní tekutině. Tampon se přiloží na testovací povrch a mikroorganismus se identifikuje odebráním tamponu do média. Tampony se často používají na nerovných površích nebo v oblastech, které je obtížné odebrat pomocí kontaktní destičky. Odběr stěru je spíše kvalitativní test.
Čas odeslání: 21. října 2024