V čistých prostorách existují dva hlavní zdroje kontaminace: částice a mikroorganismy, které mohou být způsobeny lidskými a environmentálními faktory nebo souvisejícími činnostmi v procesu. I přes maximální úsilí kontaminace do čistých prostor stále proniká. Mezi běžné nosiče kontaminace patří lidská těla (buňky, vlasy), environmentální faktory, jako je prach, kouř, mlha nebo zařízení (laboratorní vybavení, čisticí zařízení), a nesprávné techniky stírání a čištění.
Nejčastějším přenašečem kontaminace jsou lidé. I s nejpřísnějším oblečením a nejpřísnějšími provozními postupy představují nesprávně vyškolení operátoři největší hrozbu kontaminace v čistých prostorách. Zaměstnanci, kteří nedodržují pokyny pro čisté prostory, představují vysoce rizikový faktor. Pokud jeden zaměstnanec udělá chybu nebo zapomene na nějaký krok, povede to ke kontaminaci celého čistého prostoru. Společnost může zajistit čistotu čistého prostoru pouze neustálým monitorováním a neustálou aktualizací školení s nulovou mírou kontaminace.
Dalšími významnými zdroji kontaminace jsou nástroje a zařízení. Pokud se vozík nebo stroj před vstupem do čistého prostoru jen hrubě otře, může do něj dojít ke kontaktu s mikroorganismy. Pracovníci si často neuvědomují, že se pojezdové zařízení při zasouvání do čistého prostoru převaluje po kontaminovaných površích. Povrchy (včetně podlah, stěn, zařízení atd.) se rutinně testují na počet životaschopných bakterií pomocí speciálně navržených kontaktních destiček obsahujících růstová média, jako je Trypticase Soy Agar (TSA) a Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA je růstové médium určené pro bakterie a SDA je růstové médium určené pro plísně a kvasinky. TSA a SDA se obvykle inkubují při různých teplotách, přičemž TSA je vystaveno teplotám v rozmezí 30–35 °C, což je optimální teplota pro růst většiny bakterií. Rozsah 20–25 °C je optimální pro většinu druhů plísní a kvasinek.
Proudění vzduchu bylo kdysi běžnou příčinou kontaminace, ale dnešní systémy HVAC pro čisté prostory prakticky eliminují kontaminaci vzduchu. Vzduch v čistých prostorách je pravidelně kontrolován a monitorován (např. denně, týdně, čtvrtletně) z hlediska počtu částic, počtu životaschopných částic, teploty a vlhkosti. HEPA filtry se používají ke kontrole počtu částic ve vzduchu a dokáží filtrovat částice až do velikosti 0,2 µm. Tyto filtry jsou obvykle udržovány v nepřetržitém provozu s kalibrovaným průtokem, aby se udržela kvalita vzduchu v místnosti. Vlhkost se obvykle udržuje na nízké úrovni, aby se zabránilo množení mikroorganismů, jako jsou bakterie a plísně, které preferují vlhké prostředí.
Ve skutečnosti je nejvyšším a nejčastějším zdrojem kontaminace v čistých prostorách obsluha.
Zdroje a vstupní cesty kontaminace se v jednotlivých odvětvích významně neliší, ale mezi odvětvími existují rozdíly, pokud jde o tolerovatelnou a netolerovatelnou úroveň kontaminace. Například výrobci tablet k požití nemusí udržovat stejnou úroveň čistoty jako výrobci injekčních látek, které se aplikují přímo do lidského těla.
Farmaceutické společnosti mají nižší toleranci k mikrobiální kontaminaci než technologicky vyspělé elektronické výrobky. Výrobci polovodičů, kteří vyrábějí mikroskopické produkty, nemohou akceptovat žádnou kontaminaci částicemi, aby zajistili funkčnost produktu. Proto se tyto společnosti zajímají pouze o sterilitu produktu, který má být implantován do lidského těla, a o funkčnost čipu nebo mobilního telefonu. Relativně méně se obávají plísní, houb nebo jiných forem mikrobiální kontaminace v čistých prostorách. Na druhou stranu se farmaceutické společnosti obávají všech živých i mrtvých zdrojů kontaminace.
Farmaceutický průmysl je regulován Úřadem pro kontrolu potravin a léčiv (FDA) a musí přísně dodržovat předpisy správné výrobní praxe (GMP), protože důsledky kontaminace ve farmaceutickém průmyslu jsou velmi škodlivé. Výrobci léčiv nejen musí zajistit, aby jejich výrobky neobsahovaly bakterie, ale také musí mít dokumentaci a sledovatelnost všeho. Společnost vyrábějící high-tech zařízení může dodat notebook nebo televizi, pokud projde interním auditem. Pro farmaceutický průmysl to ale tak jednoduché není, a proto je pro společnost zásadní mít, používat a dokumentovat provozní postupy pro čisté prostory. Z důvodu nákladů si mnoho společností najímá externí profesionální úklidové služby.
Komplexní program testování prostředí v čistých prostorách by měl zahrnovat viditelné i neviditelné částice ve vzduchu. Ačkoli neexistuje požadavek, aby všechny kontaminanty v těchto kontrolovaných prostředích byly identifikovány mikroorganismy, program kontroly prostředí by měl zahrnovat odpovídající úroveň bakteriální identifikace extrahovaných vzorků. V současné době je k dispozici mnoho metod bakteriální identifikace.
Prvním krokem v identifikaci bakterií, zejména pokud jde o izolaci v čistých prostorách, je Gramovo barvení, protože může poskytnout interpretační vodítka ke zdroji mikrobiální kontaminace. Pokud mikrobiální izolace a identifikace prokáže grampozitivní koky, kontaminace mohla pocházet od lidí. Pokud mikrobiální izolace a identifikace prokáže grampozitivní tyčinky, kontaminace mohla pocházet z prachu nebo kmenů rezistentních vůči dezinfekčním prostředkům. Pokud mikrobiální izolace a identifikace prokáže gramnegativní tyčinky, zdrojem kontaminace mohla být voda nebo jakýkoli mokrý povrch.
Identifikace mikrobů ve farmaceutických čistých prostorách je velmi důležitá, protože souvisí s mnoha aspekty zajištění kvality, jako jsou biologické testy ve výrobním prostředí; testování bakteriální identifikace konečných produktů; nejmenované organismy ve sterilních produktech a vodě; kontrola kvality technologie fermentačního skladování v biotechnologickém průmyslu; a ověřování mikrobiálních testů během validace. Metoda FDA pro potvrzení, že bakterie mohou přežít ve specifickém prostředí, bude stále běžnější. Pokud úrovně mikrobiální kontaminace překročí stanovenou úroveň nebo výsledky testů sterility naznačují kontaminaci, je nutné ověřit účinnost čisticích a dezinfekčních prostředků a eliminovat identifikaci zdrojů kontaminace.
Existují dvě metody pro monitorování povrchů v čistých prostorách:
1. Kontaktní desky
Tyto speciální kultivační misky obsahují sterilní růstové médium, které je připraveno tak, aby sahalo výše než okraj misky. Kryt kontaktní destičky zakrývá povrch, ze kterého se má odebrat vzorek, a veškeré mikroorganismy viditelné na povrchu přilnou k povrchu agaru a inkubují se. Tato technika umožňuje zobrazit počet mikroorganismů viditelných na povrchu.
2. Metoda stěru
Toto je sterilní a skladováno ve vhodné sterilní tekutině. Tampon se aplikuje na testovaný povrch a mikroorganismus se identifikuje jeho namočením v médiu. Tampony se často používají na nerovných površích nebo v oblastech, ze kterých je obtížné odebrat vzorky kontaktní destičkou. Odběr vzorků tamponem je spíše kvalitativní test.
Čas zveřejnění: 21. října 2024